Определение иммунитета к дифтерии

Метод определения
Иммуноанализ.

Исследуемый материал
Сыворотка крови

Дифтерия — острая инфекционная болезнь, вызываемая токсигенными коринебактериями дифтерии (Corynebacterium diphtheriae); передается от человека к человеку воздушно-капельным путем, характеризуется местным фибринозным воспалением (преимущественно слизистых оболочек рото- и носоглотки), а также явлениями общей интоксикации и поражением внутренних органов. Источником инфекции является больной дифтерией или временный носитель токсигенных штаммов коринебактерий. Инкубационный период короткий – обычно 2-4 дня. Клинические формы дифтерии ротоглотки крайне разнообразны и зависят от характера и распространения фибринозной пленки, степени отека слизистой оболочки ротоглотки и подкожной клетчатки шеи, выраженности интоксикации.

Основным фактором патогенности и вирулентности C.diphtheriae является дифтерийный экзотоксин. Возбудители, продуцирующие экзотоксин, определяются как токсигенные штаммы. Существуют нетоксигенные штаммы, которые не вызывают заболевания. Способность C. diphtheriae к выработке дифтерийного токсина зависит от действия коринефагов, которые содержат структурный ген молекулы токсина. Именно с действием дифтерийного токсина связаны большинство симптомов дифтерии и летальность от этой инфекции.

Хотя чаще всего инфекция C. diphtheriae протекает бессимптомно или с относительно мягким течением, у непривитых детей и взрослых возможны тяжелые осложнения: отек горла, нарушение дыхания, поражение сердца, почек, нервной системы, высока частота летальных исходов (>10%). Имевшие место в прошлом, эпидемии дифтерии описаны в истории многих стран. Для предотвращения распространения этого заболевания в настоящее время используют систему организованной вакцинации, которая позволила значительно снизить уровень заболеваемости.

Вакцины против дифтерии основаны на дифтерийном анатоксине (токсоиде)– модифицированном бактериальном токсине. В результате вакцинации образуются антитела против дифтерийного токсина. В программе вакцинации детей вакцина против дифтерии комбинируется с вакцинами против коклюша и столбняка (АКДС). После окончания серии первичной иммунизации средняя продолжительность иммунной защиты против дифтерии составляет около 10 лет. Защитный иммунитет может усиливаться естественной встречей с циркулирующими среди населения токсигенными линиями бактерий C.diphtheriae. Сведения о защитном уровне антител изложены в разделе «Интерпретация».

Определение уровня IgG антител к дифтерийному анатоксину преимущественно используют для оценки эффективности вакцинации против дифтерии. Однако рост титров антител может служить дополнительным диагностическим признаком. Начальный диагноз дифтерии обычно может быть сделан на основании клинических признаков. Чтобы подтвердить острую инфекцию, следует выполнить прямое микробиологическое исследование материала, взятого с миндалин, ротоглотки (см. тест №469 «Посев на дифтерийную палочку»). Поскольку микробиологический метод может занять несколько дней, а серологические исследования (исследования антител) также требуют времени в связи с отсроченным формированием антител, принятие решений о лечении основывается, прежде всего на клинических симптомах.

Пределы определения: 0,01 МЕ/мл – 2 МЕ/мл

Литература

Инфекционные болезни у детей. Ред. Д.Марри. М. Практика, 2006 г., с.928.
Ющук Н.Д., Кулагина М.Т. Дифтерия: клиническое течение, диагностика и лечение. Русский медицинский журнал, 1997.-Т.5,N 4.- с.208-217.
Всемирная организация здравоохранения: Diphtheria vaccine. Weekly epidemiological record,2006, Vol 81, No 3, p.24-32. https://www.who.int/wer/2006/wer8103.pdf
Материалы фирмы-производителя реагентов.

Источник

Некоторые считают дифтерию проблемой из прошлого, болезнью-рудиментом, с которой повсеместно удалось успешно справиться. Но расслабляться еще рано. До сих пор регистрируются случаи этого заболевания, среди детей и взрослых циркулируют бактерии дифтерии. Поэтому о том, когда и какие анализы нужно сдавать на дифтерию, должен знать каждый.

Характеристика заболевания и особенности диагностики дифтерии

Дифтерия — это инфекционная болезнь, которой можно заразиться только от человека. Однако опасным может быть не только заболевший, но и носитель токсигенного (то есть производящего токсины) штамма. Такое носительство протекает без каких-либо признаков, и его можно обнаружить только с помощью лабораторного обследования.

Бактерии дифтерии — бациллы Леффлера — могут передаваться по воздуху с мельчайшими частичками влаги или пыли. Также бактерии могут передаваться при контакте с зараженными предметами обихода и изредка через зараженную еду.

На заметку

На предметах бактерии дифтерии могут жить до 5–6 месяцев, в пыли — до 5 недель, а в воде и молоке — до 20 дней. При этом прямые солнечные лучи и высокие температуры губительно действуют на эту бактерию.

При контакте с заболевшим или с носителем токсичного штамма вероятность заболеть примерно 15–20%

[1]

. Первые симптомы появляются через 2–10 дней. Повышается температура до 38–39°С, появляется боль в горле, становится сложно глотать. Признаки дифтерии сходны с ангиной, но при этом возникают и специфические симптомы.

Главная отличительная особенность — это тип поражения миндалин. На них образуется налет в виде плотных пленок. Свежие пленки снимаются достаточно легко, но они быстро утолщаются и становятся плотными. Если такую пленку с силой снять с миндалины, то под ней чаще всего образуется кровоточащая эрозия.

Такая типичная клиническая картина с высокой температурой, выраженной интоксикацией, ознобами, головной болью и бледностью кожи развивается у непривитых и имеющих слабый противодифтерийный иммунитет людей. При более высоком уровне иммунитета вместо пленок может образовываться рыхлый налет, а само заболевание протекает менее остро. Поэтому атипичные формы дифтерии легко можно спутать с обычной ангиной

[2]

Однако дифтерия страшна не только сама по себе, но и своими осложнениями.

Среди них выделяют:

инфекционно-токсический шок;
миокардит — поражение сердечной мышцы;
полинейропатию — поражение периферических нервов;
нефрозы — дистрофические процессы в почках;
ДВС-синдром — нарушение свертываемости крови;
круп — осложненное стенозом гортани воспаление дыхательных путей
[3]
.

Еще в середине XX века дифтерия была распространенной проблемой, вызывавшей осложнения, связанные с риском для жизни, у каждого пятого взрослого пациента и у каждого десятого заболевшего ребенка

[4]

Пример из литературы

Михаил Булгаков в своем цикле рассказов «Записки юного врача» описывал дифтерийный круп у трехлетней девочки. Из-за отека, воспаления и большого количества дифтерийных пленок девочка задыхалась. В рассказе молодому врачу удалось спасти ее, сделав трахеотомию с серебряной трубкой. Когда дифтерия была распространенным заболеванием, такие случаи не были редкостью.

В 1955 году в СССР было официально зарегистрировано около 321 000 случаев дифтерии

[5]

. В 2015 году, 60 лет спустя, на всей территории России было зарегистрировано только 2 заболевших

[6]

. То есть заболеваемость снизилась практически в 160 000 раз.

Так как в России регистрируются только единичные случаи дифтерии, далеко не все молодые врачи за свою практику сталкивались с этим заболеванием. Тем более что она может протекать в стертой или бессимптомной форме, маскируясь под ангину и менее опасные заболевания. Поэтому своевременная лабораторная диагностика играет значительную роль в выявлении этого заболевания.

Кроме обследования пациентов с подозрением на дифтерию проводится регулярный серомониторинг — определение уровня иммунитета среди группы населения. Например, среди детей 3–4 лет, 16–17 лет и взрослых. Это помогает оценить коллективный иммунитет, вероятность возникновения вспышек и распространения заболевания

[7]

В лабораторной диагностике дифтерии существует несколько проблем. Если заболевший уже начал принимать антибиотики, то количество микробов на поверхности горла или носа будет минимальным. Из-за этого не всегда удается выявить микроб, особенно если пациент без консультации со специалистом «назначает» себе противомикробные препараты.

Еще одна проблема — это генетическая структура бактерии. Метод ПЦР позволяет выявлять токсигенные и нетоксигенные штаммы. Но у некоторых «безопасных» штаммов бактерии дифтерии есть скрытый ген, который отвечает за производство токсина. По данным молекулярного анализа таких бактерий может быть до 40%. При некоторых условиях этот ген может активироваться и бактерии внезапно становятся опасными для человека

[8]

Какие анализы на дифтерию могут быть назначены?

Для диагностики дифтерии используются несколько методов — бактериологический, серологический и ПЦР-анализ, а также клинический анализ крови.

Основным методом, который позволяет установить диагноз, является

микробиологическая диагностика

дифтерии. Ее проводят при ангине с характерным выпотом на миндалинах, при подозрении на инфекционный мононуклеоз, паратонзиллярный абсцесс или ларинготрахеит. Это позволяет на самом раннем этапе исключить дифтерию.

С профилактической целью бактериологическое исследование проводят для поступающих на лечение или на работу в психоневрологические стационары, противотуберкулезные учреждения, дома ребенка. Такое обследование проводится, чтобы предотвратить вспышки инфекции в закрытом учреждении

[9]

Для проведения бактериологического исследования с пораженной поверхности забирают мазок и помещают его в транспортную питательную среду. Примерно через 5–7 дней из лаборатории приходит ответ, есть ли в биоматериале рост дифтерийной палочки и обнаружены ли у нее токсигенные свойства. В норме роста быть не должно. Если в результатах исследования указан нетоксигенный штамм, это тоже в большинстве случаев не страшно. Достаточно провести профилактику по назначенной врачом схеме. А вот если выявлен токсигенный штамм, придется пройти полный курс лечения и обследовать всех контактировавших с пациентом лиц.

Как дополнение к бактериологическому методу могут использовать

ПЦР-диагностику

. Показания к ее проведению те же, что и для бактериологического метода. Но для установления диагноза она уже не является обязательной. Материал для ПЦР-исследования забирают из очага поражения и помещают в специальную среду. В лаборатории выделяют гены дифтерийной бактерии, в том числе отвечающие за ее токсичность. Интерпретируют результат так же, как и при бактериологическом методе: в лучшем случае следы присутствия бактерии не должны обнаружить. Если же выявлен токсигенный штамм, придется срочно проходить лечение.

Анализы на антитела к дифтерии

, такие как РПГА или ИФА, позволяют оценить уровень иммунитета, защищенность от инфекции. Рост титров противодифтерийных антител более чем в 4 раза в течение двух недель является дополнительным критерием для установления диагноза. В качестве серомониторинга определение уровня антител проводится у «индикаторных» групп, о которых мы говорили выше. Для проведения серологических исследований забирают кровь из вены. В лаборатории из нее выделяют сыворотку и определяют в ней содержание антител. Это занимает примерно 2–5 рабочих дней.

При расшифровке результатов действует правило «чем больше, тем лучше». Если уровень антител ниже 1:10 или меньше 0,01 МЕ/мл в зависимости от метода исследования, иммунитета против дифтерии нет. Есть опасность заболеть и желательно провести вакцинацию, даже если раньше прививку уже делали. Если уровень иммунитета выше 1:1280 или больше 1,0 МЕ/мл — иммунитет против этой инфекции достаточно высок

[10]

Еще один вспомогательный метод — клинический анализ крови. С его помощью нельзя отличить, например, дифтерию от ангины, но можно сказать, что воспаление вызвано бактериальной инфекцией. Для проведения этого анализа также берут кровь из вены. Этот анализ занимает всего 1–2 рабочих дня. При бактериальной инфекции повышается уровень СОЭ, количество лейкоцитов и нейтрофилов.

Где можно сдать биоматериал на исследование

Анализы на дифтерию можно сдать как в государственных клиниках, так и в частных лабораториях. Анализ крови можно сдать в любой лаборатории и, чаще всего, для этого даже не нужно будет направление врача. А вот специфические анализы на дифтерию проводят уже не все, поэтому лучше заранее уточнить этот момент.

Забор материала лучше сдавать в клинике с собственной лабораторией, особенно это касается бактериологического и ПЦР-исследования. Результаты этих анализов во многом зависят от того, насколько точно соблюдали правила забора мазков, хранения и транспортировки материала. При нарушении на любом из этих этапов можно получить ложный отрицательный результат.

В государственном учреждении по направлению все эти исследования можно пройти бесплатно. В частной лаборатории придется заплатить как за само исследование, так и за взятие биоматериала. Но и уровень сервиса при этом обычно выше. Например, некоторые лаборатории высылают результаты исследований на электронный адрес или публикуют их в личном электронном кабинете пациента, так что возвращаться за бланками уже не нужно. Их можно распечатать самостоятельно в любой момент.

Несмотря на то, что дифтерия стала практически забытой проблемой, бактерия–возбудитель все еще представляет опасность, особенно для тех, чей иммунитет не может сопротивляться заболеванию. Поэтому стоит сдать анализы на дифтерию при ангине и подобных заболеваниях, исследовать кровь, а в идеале — заранее узнать свой уровень иммунитета против заболевания. Лучше перестраховаться, чем потом оказаться среди тех самых «единичных случаев» дифтерии, которые все еще регистрируются в России.

Источник

Работа добавлена на сайт samzan.ru: 2016-03-13

Определение иммунитета к дифтерии

Бесплатно

Узнать стоимость работы

4 билет

1. Особенности иммунитета при дифтерии; его определение: материал, метод и критерии оценки.

опасное инфекционное заболевание, вызываемое бактерией Corynebacterium diphtheriae (палочка Леффлера). Инфекция передаётся воздушно-капельным путём.Источниками инфекции являются больные с различными формами дифтерии и бактерионосители. Возбудитель дифтерии находится преимущественно в носоглотке и в верхних отделах респираторного тракта источника инфекции Иммунитет при дифтерии носит не антибактериальный, а антитоксический характер, поэтому при заражении заболевают далеко не все инфицированные. При недостаточном антитоксическом иммунитете, особенно если организм подвергается ослабляющему влиянию дополнительных факторов, может возникнуть заболевание, при этом его клинические проявления будут иметь не всегда типичный характер. Полное отсутствие антитоксического иммунитета ведет к заболеванию дифтерией. Различают транзиторное носительство, когда токсигенные дифтерийные микробы выявляются однократно, кратковременное — до 2 нед, средней продолжительности (15-30 дней), затяжное- более одного месяца и хроническое (рецидивирующее) — свыше 6 мес. Более продолжительное носительство кори и дифтерии выявляется у лиц, которые общаются с больными дифтерией и имеют хроническую патологию рото- и носоглотки.

1. Бактериологический анализ рекомендуется у больных с подозрением на дифтерийную инфекцию или бактерионосительство. рекомендуется забор материала отдельно из носа и/или из зева.

Материалом для исследования служат слизь из носа и из зева.

Забор материала производится тампоном (отдельным тампоном — нос, отдельно -зев) в транспортную среду Amies.

Хранение взятого материала при t =+2+8° C — не более 24 часов.

В направлении обязательно указать пол, возраст, использование антибиотикотерапии.

2. Серологический метод (реакция пассивной гемагглютинации) рекомендуется
для больных динамическое исследование

при дифференциальной диагностике дифтерии и других заболеваний респираторного тракта;
для оценки нарастания уровня противодифтерийных антител в процессе лечения, прогноза тяжести и течения заболевания.

для здоровых

для определения показаний к вакцинации;
динамическое исследование — при оценке эффективности вакцинопрофилактики.

Материалом для исследования служит кровь (сыворотка).

Забор крови для исследования крови производится ТОЛЬКО в «СУХУЮ» ПРОБИРКУ — без антикоагулянта!!!

Хранение взятого материала Кровь должна быть доставлена в лабораторию в день забора. Пробирку с кровью до исследования хранят в холодильнике при t =+2°+8° C .

В направлении обязательно указывать пол, возраст, вакцинирован или нет.

Обосновать выбор методов микробиологической диагностики коклюша на первой неделе заболевания. Что будет сообщено в бланке-ответе лечащему врачу в случае подтверждения клинического диагноза?Бактериологический метод выделение B. pertussis из слизи задней стенки глотки, которую забирают натощак или спустя 23 ч после еды. Применяют два способа: метод «кашлевых пластинок» и «заднеглоточного тампона». Посев осуществляют на казеиново-угольный агар. Предварительный ответ может быть получен на 35-е сутки, окончательный лишь на 57-е сутки. С диагностической целью обследуют лиц с подозрением на коклюш и кашляющих свыше 7 дней, но не более 30 дней.

3.Туберкулин. Что содержит, для чего и как применяется.Туберкулин, диагностические препараты, применяемые для выявления аллергической реакции у лиц, инфицированных туберкулёзными бактериями. жидкий Туберкулин, или альттуберкулин Коха (АТК), получают путём выпаривания жидкой среды, на которой выращивались бактерии туберкулёза; сухой очищенный Туберкулин (ППД) посредством добавления к фильтрату бактерий осаждающих белок химических веществ, с последующей очисткой; жидкий очищенный Туберкулин (ППД-Л) путём стандартных разведений сухого очищенного Туберкулин Применяют для туберкулиновых проб (см. Манту реакция, Пирке реакция), посредством которых выявляют лиц, подлежащих прививкам против туберкулёза, как метод ранней диагностики и оценки течения туберкулёзного процесса.

5 билет

1.Биологические особенности микобактерий туберкулеза, связанные с высоким содержанием липидов в микробной клетке

Возбудителями туберкулёза являются микобактерии кислотоустойчивые бактерии рода Mycobacterium. туберкулёз у человека вызывает условно выделенный комплекс, включающий в себя Mycobacterium tuberculosis (человеческий вид), Mycobacterium bovis (бычий вид), Mycobacterium africanum, Mycobacterium bovis BCG (БЦЖ-штамм бычьего вида), Mycobacterium microti, Mycobacterium canettii. С наличием высокого содержания липидных фракций в капсуле и мембране возбудителя связана кислотоустойчивость микобактерии. Биологической активностью липидов обусловлена также вирулентность микобактерии и их токсическое действие на клетки макроорганизмов.

2.Материал, правила его забора и посева при подозрении на дифтерию зева.

На возбудителей дифтерии из зева при наличии налетов на границе здоровой и пораженной ткани. При отсутствии налетов как на микрофлору. Одновременно — из носа тампоном из обоих носовых ходов.
При подозрении на дифтерию по цито — 2 или 3 тампона из зева для прямой бактериоскопии, постановки опыта на токсигенность, посева. По показаниям — из мест редкой локализации: отделяемое глаз, уха, ран, другое. Доставлять не позднее 2 часов с момента взятия.
В вечерние, ночные часы, воскресенье материал опускать в теплую среду обогащения и хранить в термостате +35′ С до утра. Для диагностики дифтерии обязательны бактериологические исследования. Для посева на дифтерию производится забор материала со слизистой носа и зева (в отдельные пробирки с транспортной средой). Пробы со слизистой оболочки зева необходимо забирать до утреннего туалета полости рта, натощак. Для получения проб из носа тампон вводят на глубину 1-2 см в каждую ноздрю и забирают отделяемое со слизистой оболочки носа. Исследование проводится до начала приема антибиотиков и не ранее, чем через 3 дня после завершения лечения. Дается информация об отсутствии или наличии роста. В случае положительного результата указывается наличие токсигенных свойств выделенного штамма дифтерии.

АКДС. АКДС — адсорбированная коклюшно-дифтерийно-столбнячная комбинированная вакцина против дифтерии, коклюша и столбняка. Прививка делается четырёхкратно в первый год жизни, начиная обычно с 3 месяцев. Отличается высоким процентом осложнений и повышенной аллергенностью. Самая опасная вакцина. омбинированные вакцины относят к цельноклеточным, т.е. содержащим убитые (инактивированные) клетки возбудителей коклюша (4 МЕ*), столбняка (40 МЕ или 60 МЕ) и дифтерии (30 МЕ). Такая дозировка столбнячных и дифтерийных анатоксинов обусловлена необходимостью достижения нужной интенсивности реакции иммунной системы ребенка, которая ещё несовершенна и только формируется.

Особенности патогенеза туберкулеза.

Mycobacterium tuberculosis

Микобактерии туберкулеза могут попадать в организм различными путями: аэрогенно, энтерально (через желудочно-кишечный тракт), через поврежденную кожу и слизистые оболочки, через плаценту при развитии плода. Однако основным путем заражения является аэрогенный.

Инфекционный процесс начинается с размножения микобактерии в легких и приводит к формированию пневмонического очага. Процесс размножения микобактерии происходит медленно и непрерывно. По лимфатическим путям МБТ попадают в лимфатические узлы средостения. Пневмонический участок в легких и региональный лимфаденит образуют первичный туберкулезный комплекс, откуда с кровотоком МТБ разносятся в органы и ткани. Дальнейшее развитие процесса зависит от состояния иммунной системы. У большинства лиц с нормальным иммунным ответом размножение МБТ будет остановлено, однако часть из них может существовать латентно. У лиц с ослабленным иммунитетом происходит размножение МБТ, и через несколько месяцев развивается первичный туберкулез. Вторичный туберкулез может возникнуть через несколько лет после инфицирования МБТ в результате реактивации старого туберкулезного очага или реинфекции (повторного заражения лиц, уже перенесших первичную инфекцию). туберкулез может поражать любые органы и ткани, но чаще всего (в 80-85% случаев) страдают легкие. Обычно иммунный ответ формируется через 46 недель после заражения. У не имеющих симптомов заболевания инфицированных лиц единственным показателем инфицирования может быть положительная туберкулиновая проба Манту,

2.Препараты, применяемые для специфической профилактики и терапии дифтерии. Обоснуйте тактику их применения.

Специфическая профилактика

Проводится вакциной АКДС, начиная с 3-х месячного возраста. Зарубежные вакцины, зарегистрированные в России:

инфанрикс (Бельгия) — коклюшно-дифтерийно-столбнячная вакцина; или
Д.Т.Вакс (Франция) — коклюшно-дифтерийно-столбнячная вакцина; или
тетракок (Франция) — коклюшно-дифтерийно-столбнячная вакцина и инактивированная вакцина для профилактики полиомиелита.

Вакцинируют трехкратно с интервалом 30-40-дней.

Ревакцинация (повторная вакцинация) проводится АКДС-вакциной однократно через 1,5-2 года после законченной вакцинации.

Ревакцинация в 6-7, 11-12, 16-17 лет проводится вакциной АДС-М.

Для прививок взрослых применяется АДС-М в форме плановой иммунизации каждые 10 лет до 56 лет включительно.

Лица, переболевшие дифтерией, также подлежат вакцинации.

Лица с неизвестным прививочным анамнезом подлежат серологическому обследованию на антитоксических антител . При отсутствии защитного титра антитоксинов (более 1:20) проводится вакцинация.

3.БЦЖ. БЦЖ бацилла Кальметта Герена (Bacillus CalmetteGuérin) вакцина против туберкулёза, приготовленная из штамма ослабленной живой коровьей туберкулёзной бациллы, Mycobacterium bovis, которая утратила вирулентность для человека, будучи специально выращенной в искусственной среде. Прививают новорожденных детей в роддоме на четвертый день их жизни. Вакцина вводится в левое плечо. БЦЖ новорожденным проводится в такие ранние сроки после рождения по причине сильной восприимчивости грудных детей к инфекциям. Прививка БЦЖ не может предотвратить возможного инфицирования туберкулезом, но может помочь предотвратить переход скрытой инфекции в свою активную стадию. Т.е. главная цель вакцинации профилактика туберкулеза.

Источник