Иммунный статус комплексное исследование клеточный и гуморальный иммунитет
Циркулирующие иммунные комплексы (ЦИК) представляют собой комплексы, состоящие из антител, антигена и компонентов комплемента. Образование ЦИК – нормальный механизм защиты организма, но иногда, вследствие избыточного накопления, ЦИК сохраняются в течение длительного времени и откладываются в различных тканях и органах, приводя к их поражению (при системной красной волчанке (СКВ)).
Уровень ЦИК в крови – показатель развития различных воспалительных процессов в организме и показатель активности течения аутоиммунных заболеваний.
Показания
· диагностика и наблюдение за течением аутоиммунных и ревматоидных заболеваний (диффузных болезней соединительной ткани, системных васкулитов. СКВ, болезни Крона, аутоиммунного гепатита, коллагенозов и др.);
· диагностика и наблюдение за течением хронических инфекционных заболеваний (ВИЧ-инфекции, подострого инфекционного эндокардита и др. вирусных, бактериальных и грибковых заболеваний);
· наблюдение за течением хронических воспалительных заболеваний почек (гломерулонефрита);
· в комплексе с другими исследованиями для диагностики иммунодефицитных состояний (входит в исследование иммунного статуса)
Методика
Определение ЦИК в сыворотке крови осуществляется методом иммунного турбидиметрического анализа.
С3 и С4-компоненты комлемента
Белки компонента комплемена синтезируются в печени и в норме присутствуют в плазме в неактивной форме. Пусковыми механизмами активации системы комплемента является проникновение в организм бактерий и вирусов, грибов, простейших.
Показания:
диагностика болезней иммунных комплексов — системная красная волчанка (СКВ), генерализованные васкулиты, гломерулонефрит, энтеропатии (болезнь Крона, неспецифический язвенный колит), аутоиммунная гемолитическая анемия.
При рецидивирующих инфекциях: стрептококковом и стафилококковом сепсисе, бактериальных и вирусных менингитах, паразитарных инвазиях.
Мониторинг лечения болезней иммунных комплексов— СКВ, аутоиммунный тиреоидит, ювенильный дерматомиозит.
Диагностика наследственного дефицита компонентов комплемента -ангионевротический отек или болезнь Квинке, дефицит С3 при рекуррентных инфекциях, дефицит С4 при СКВ.
Методика
Определение С3 и С4 – компонентов комплемента осуществляется турбодиметрическим методом на биохимическом анализаторе «АRCHITECT с8000»
Иммунный статус (субпопуляционное определение абсолютного и относительного количества лимфоцитов CD3+, CD4+, CD8+, CD19+, естественных киллеров CD16+, общих IgA, IgM, IgG, ЦИК, подсчет ИРИ)
Для оценки клеточного иммунитета определяются его основные параметры (относительное содержание клеток в крови): зрелые Т-клетки, Т-хелперы, Т-супрессоры /цитотоксические, В-клетки, NK-клетки (естественные киллеры) и иммуно-регуляторный индекс (ИРИ) – соотношение Т-хелперов и Т-супрессоров/цитотоксических.
Показания
· выявление первичного и вторичного иммунодефицита,
· контроль за проведением иммуностимулирующей терапии.
Методика
Определение основных параметров клеточного иммунитета проводится методом проточной цитометрии с использованием реагентов «Лаборатория КОНСТАНТА» на проточном цитометре «Partec CyFlow».
Кроме показателей клеточного иммунитета, в иммунный статус входят показатели гуморального иммунитета: общие IgA, IgM, IgG, и ЦИК.
Подготовка
Взятие крови предпочтительно проводить утром натощак, после 8 – 14 часов ночного периода голодания (воду пить можно), допустимо днем через 4 часа после легкого приема пищи. Накануне исследования необходимо исключить психоэмоциональные и физические нагрузки (спортивные тренировки), прием алкоголя, за час до исследования – курение. Отказаться от приема лекарственных препаратов: даназол, гидралазин, фенитоин, антибактериальных препаратов пенициллинового ряда, метилдопа, цимстидин, пероральные контрацептивы.
Общие сведения
Панель «Иммунный статус (клеточный и гуморальный иммунитет)
— показатель системы иммунитета в котором исследуются компоненты иммунитета человека представленные белками, циркулирующими в сыворотке крови и клеточным компонентом:
общее количество лейкоцитов, лимфоцитов, идентифицируемых по различным антигенам —
Т-лимфоциты(CD3+); Лейкоцитиарно-Т-лимфоцитарный индекс; Т-хелперы (CD3/CD4+); Т-цитотоксические (CD3/8+); Иммунорегуляторный индекс CD4/C8; В-лимфоциты (CD19+); NK-клетки (CD16/56+); Т-клетки NK (CD3/16/56+); Дубль клетки CD4+/CD8+; 0-лимфоциты.
С3,С4 — компоненты комплемента, иммуноглобулины А, М, G, циркулирующие иммунные комплексы, С-реактивный белок – комплексный показатель иммунного состояния человека.
Основные показания к применению: диагностика иммунодефицитных состояний, инфекционных, лимфопролиферативных, аутоиммунных заболеваний, онкологических заболеваний, контроль приема цитостатиков и иммуномодуляторов.
Общее количество лейкоцитов, лимфоцитов – показатель состояния клеточного иммунитета.
CD — каждая стадия дифференцировки клеток крови характеризуется набором антигенов (кластеры дифференцировки — claster of differentiation) – СD, представляющие собой белки или гликопротеиды на поверхности лимфоцитов, обладающих различными функциями, обозначенные номерами).
Одновременно под CD понимают и специфические антитела против того или иного антигена CD.
Основными клетками, осуществляющими иммунные реакции, являются Т- и В-лимфоциты, производные В-лимфоцитов – плазмоциты, макрофаги, тучные клетки, эозинофилы и другие клетки.
Популяция лимфоцитов неоднородна. Различают три основных вида лимфоцитов: Т-лимфоциты, В-лимфоциты и так называемые нулевые лимфоциты (0-клетки). Лимфоциты развиваются из недифференцированных лимфоидных костномозговых предшественников и при дифференцировке получают функциональные и морфологические признаки (наличие маркеров, поверхностных рецепторов), выявляемые иммунологическими методами. 0-лимфоциты (нулевые) лишены поверхностных маркеров и рассматриваются как резервная популяция недифференцированных лимфоцитов.
Основными маркерами, которые используются для идентификации В-клеток в человека являются: СD19, CD20, CD22, CD72, CD78.
Основными маркерами для идентификации Т-клеток являются: СD3, СD4 (маркер Т-лимфоцитов-хелперов). Данные Т-хелперы (CD4+лимфоциты), синтезируют цитокины, что приводит к развитию устойчивой, CD8 (маркер Т-лимфоцитов — супрессоров). Отношение CD4/CD8 — индекс регуляции. Отношение CD4/CD8 (индекс регуляции/иммунорегуляторный индекс) — повышается в острой фазе многих воспалительных заболеваний, при многих аутоиммунных заболеваниях, при обострении заболеваний. Снижение (менее 1) характерно при иммунодефиците у больных СПИД, ряде онкологических заболеваний (саркома Капоши).
Основные поверхностные маркеры НК-клеток (NK) — нормальных киллеров являются: CD7, CD 16 (чаще всего), CD8, CD56, CD57. Большая часть антигенов на поверхности НК-клеток, присутствует и на Т-клетках, а также на моноцитах (макрофагах).
Субпопуляцию Т-лимфоцитов, экспрессирующих на своей поверхности маркеры NK-клеток, а именно, молекулы CD3 называют NKT-клетки (NKT-клетки CD3+). Их роль в регуляции иммунной системы до конца не изучена.
Основная функция НК-клеток — распознавание и уничтожение клеток ряда опухолей, и клеток инфицированных вирусами.
О-лимфоциты — нулевые лимфоциты не имеющие рецепторов присущих для Т и В-лимфоцитов.
Исследуя эти маркеры, можно определить, какому заболеванию соответствуют типы клеток, и провести дифференцировку лимфопролиферативных и других заболеваний. Количество антигенов при различных патологиях изменяется, что может быть использовано в качестве диагностического приема для оценки патологических состояний и контроля лечения.
CD3 – антиген, исследуется в диагностике острых Т-клеточных лейкозов, лимфом, состояний иммунодефицита.
CD4 –антиген, обнаруживается при Т-клеточных лимфомах, Т-клеточном лейкозе. CD4 обнаруживается на лимфоцитах, которые относятся к хелперам первого типа. Данные Т-хелперы (CD4+лимфоциты), синтезируют цитокины, что приводит к развитию устойчивой воспалительной реакции.
CD8- антиген в большей степени характерен для цитотоксических и супрессорных Т-лимфоцитов. Используется для оценки количества Т-супрессоров. Данные CD8+лимфоциты способны лизировать клетки, экспрессирующие специфические антигены. CD8+ лимфоциты уничтожают только те клетки, которые экспрессируют на своей поверхности антигены, присущие опухолевым клеткам или клеткам инфицированных вирусами. Другими словами можно сказать, что появление на поверхности клеток антигенов инфицированных вирусом или антигенов опухолевых клеток является командой для их лизиса. Такой же механизм цитотоксичности лежит в основе патогенетических реакций при отторжении после пересадки органов.
СD16 – антиген на поверхности естественных киллеров (NK-клетки), выявляется при хронических миелоцитарных лейкозах. Это маркер лимфоцитов — эффекторов, ответственных за противовирусный, противоопухолевый и трансплантационный иммунитет.
CD 19- антиген характерен для В-лимфоцитов, обнаруживается при острых В-клеточных лейкозах.
CD 56 – антиген, характерен для естественных киллеров, ответственных за противовирусный и противоопухолевый иммунитет. Является маркером в диагностике Т-клеточной лимфомы, плазмоклеточной миеломы.
CD3/HLA-DR — один из антигенов лейкоцитов системы антигенов комплекса гистосовместимости HLA II, находящихся на активированных зрелых Т-лимфоцитах.
NK-клетки — популяция больших гранулярных лимфоцитов, которые разрушают клетки мишени не покрытые антителами. Для осуществления своей функции они не нуждаются в предварительной антигенной стимуляции. Данные клетки — ранний фактор защиты организма от патогенных возбудителей, который вступает с ними во взаимодействие еще до формирования антигенспецифического ответа иммунной системы. Им отводится роль в формировании эффективного противовирусного и противоопухолевого иммунитета. В популяции натуральных киллеров есть субпопуляция киллеров, экспрессирующих Т-клеточный маркер (СD3). Эту популяцию клеток называют NKT, играющей существенную роль в механизмах противоопухолевой защиты.С3 компонент комплемента
– показатель защитной функции организма при инфекциях и показатель в диагностике заболеваний связанных с аутоиммунным компонентом. Проявляет себя как белок острой фазы. Основные показания к применению: различные грибковые, паразитарные и бактериальные инфекции, гломерулонефрит, заболевания печени, ревматический полиартрит, системная красная волчанка, склонность к внезапным или повторяющимся тяжелым инфекциям. Определение, как правило, проводят одновременно с С4 компонентом комплемента и другими показателями, отражающими состояние иммунной системы (см.»
Иммунный статус
«).
С4 компонент комплемента
– показатель защитной функции организма при инфекционном процессе и показатель в диагностике заболеваний связанных с аутоиммунным компонентом. Основные показания к применению: злокачественные новообразования, саркомы, системная красная волчанка, гломерулонефрит, лечение иммунодепрессантами и цитостатиками, склонность к внезапным и повторяющимся тяжелым инфекциям. Определение , как правило, проводят одновременно с определением С3 компонента комплемента и другими тестами определения иммунного статуса человека (см. »
Иммунный статус
«).
Иммуноглобулины (общие)
А
,
М
,
G
Иммуноглобулин А (IgA) — показатель гуморального иммунитета. Основные показания к применению: оценка местного иммунитета, течения инфекционных процессов, заболеваний печени, почек, хронического воспаления.
Иммуноглобулин М (IgM) — показатель гуморального иммунитета. Основные показания к применению: оценка иммунитета, течения инфекционных процессов, заболеваний печени, почек.
Иммуноглобулин G (IgG ) — основной показатель гуморального иммунитета. Основные показания к применению: различные инфекционные процессы, острые и хронические заболевания, аутоиммунные заболевания, хронический пиелонефрит, ревматизм, коллагенозы, миеломная болезнь, заболевания, приводящие к истощению иммунной системы.Циркулирующие иммунные комплексы
— показатель развития различных воспалительных процессов в организме и показатель активности течения аутоиммунных заболеваний. Основные показания к применению: аутоиммунные заболевания, ревматизм, коллагенозы, вирусные бактериальные и грибковые заболевания, гломерулонефрит, артриты, аллергия.
С — реактивный белок
— белок острой фазы, является показателем воспаления. Основные показания к применению: различные инфекционные заболевания, аутоиммунные заболевания, постоперационый мониторинг, оценка эффективности лечения, оценка риска развития сердечной патологии.
Общее количество Т-лимфоцитов (СD3). Снижение количества Т-лимфоцитов определяется интенсивностью идущего воспалительного процесса, однако такая закономерность наблюдается не всегда. Повышение количества Т-лимфоцитов в течение воспалительного процесса является благоприятным признаком, а высокий уровень Т-лимфоцитов при резко выраженных клинических проявлениях такого процесса, напротив, — неблагоприятный признак, указывающий на вялое течение воспалительного процесса с тенденцией к хронизации. Полное завершение воспалительного процесса сопровождается нормализацией количества Т-лимфоцитов.
Повышение относительного количества Т-лимфоцитов не имеет для клиники большого значения. Однако увеличение абсолютного количества Т-лимфоцитов в крови очень важно для диагностики лейкозов. Определение CD3-лимфоцитов показано для диагностики острых Т-клеточных лейкозов, лимфом (CD3-антиген не экспрессируется при не-Т-клеточных лимфоидных новообразованиях) и иммунодефицитных состояний.
Т-лимфоциты-хелперы (СD4). Ведущее значение в оценке состояния иммунной системы имеет соотношение Т-хелперов и Т-супрессоров в периферической крови, так как от этого зависит интенсивность иммунного ответа. В норме цитотоксических клеток и антител должно вырабатываться столько, сколько их необходимо для выведения того или иного антигена. Индекс СD4/СD8 1,5-2,5 соответствует нормергическому состоянию; более 2,5 — гиперактивности; менее 1,0 — иммунодефициту. При тяжелом течении воспалительного процесса соотношение СD4/СD8 может быть меньше 1. Принципиальное значение это отношение имеет в оценке иммунной системы у больных СПИДом. При данном заболевании вирус иммунодефицита человека избирательно поражает и разрушает СD4 лимфоциты, в результате чего соотношение СD4/СD8 становится значительно меньше 1.
Повышение соотношения СD4/СD8 (до 3) нередко отмечается в острой фазе различных воспалительных заболеваний, за счет повышения уровня Т-хелперов и снижения Т-супрессоров. В середине воспалительного заболевания отмечается медленное снижение Т-хелперов и повышение Т-супрессоров. При стихании воспалительного процесса эти показатели и их соотношения нормализуются. Повышение соотношения СD4/СD8 характерно практически для всех аутоиммунных заболеваний: гемолитической анемии, иммунной тромбоцитопении, тироидита Хашимото, пернициозной анемии, синдрома Гудпасчера, системной красной волчанки, ревматоидного артрита. Увеличение соотношения СD4/СD8 за счет снижения уровня СD8 при перечисленных заболеваниях выявляется обычно в разгаре обострения при большой активности процесса. Снижение соотношения СD4/СD8 из-за роста уровня СD8 характерно для ряда опухолей, в частности саркомы Капоши.
Т-лимфоциты-супрессоры (СD8). Увеличение количества СD8 в крови свидетельствует о недостаточности иммунитета, снижение — об гиперактивности иммунной системы. Ведущее значение в оценке состояния иммунной системы имеет соотношение хелперов и супрессоров в периферической крови — индекс СD4/СD8.
Снижение функции Т-супрессоров ведет к преобладанию стимулирующего влияния Т-хелперов, в том числе и на те В-лимфоциты, которые продуцируют «нормальные» аутоантитела. При этом их количество может достигнуть критического уровня, что способно вызвать повреждение собственных тканей организма. Данный механизм повреждения характерен для развития ревматоидного артрита и системной красной волчанки.
Натуральные киллеры (СD16). Снижение количества СD-16 приводит к развитию онкологических заболеваний и утяжелению течения вирусных инфекций, аутоиммунных заболеваний, повышение — к кризу отторжения органов у реципиентов.
Общее количества В-лимфоцитов (СD-19). Во второй половине нормально развивающегося воспалительного процесса в большинстве случаев повышается в крови относительное количество В-лимфоцитов. Наиболее часто это наблюдается при вирусных инфекциях. Как правило, данный показатель повышается параллельно увеличению регионарных лимфоузлов. Процентное содержание В-лимфоцитов нарастает обычно при затяжных воспалительных процессах. Для клинициста наиболее важное значение имеет анализ уровня В-лимфоцитов после окончания клинических проявлений воспалительного процесса. Во всех случаях на полное окончание процесса указывает нормализация относительного количества В-клеток.
С3 компонент комплемента. Увеличение концентрации C3: острые бактериальные, грибковые, паразитарные и вирусные инфекции, холестаз, желчнокаменная болезнь, увеличение концентрации, острые бактериальные, грибковые, паразитарные и вирусные инфекции, холестаз, желчнокаменная болезнь
Снижение концентрации C3: врожденные дефекты комплемента, недостаточность системы комплемента, аутоиммунные заболевания, системная красная волчанка, гломерулонефрит, рецидивирующие инфекции, болезнь Рейно, лимфогранулематоз, хронический лимфолейкоз, герпетиформный дерматит, иммунокомплексные заболевания, гепатит, цирроз печени, лечение цитостатиками и иммунодепрессантами.
С4-компонент комплемента. Увеличение концентрации C4: злокачественные новообразования, саркомы, лимфомы.
Снижение концентрации C4: болезни иммунных комплексов, системная красная волчанка, гломерулонефрит, лечение цитостатиками и иммунодепрессантами.
Иммуноглобулины А (IgA). Снижение уровня свидетельствует о недостаточности гуморального и местного иммунитета, нарушении синтеза или усилении катаболизма IgA, а также адсорбции его на иммунных комплексах.
Иммуноглобулины М (IgM). IgM-антитела появляются на первом этапе иммунного ответа и находятся в основном в сосудистом русле, они играют важную защитную роль при бактериемии на ранних стадиях инфекции. Многовалентность этих антител делает их особенно активными в реакциях агглютинации и лизиса. Снижение их уровня свидетельствует о недостаточности гуморального иммунитета, нарушении синтеза или усилении катаболизма IgM, а также адсорбции его на иммунных комплексах при воспалительных процессах.
Иммуноглобулины G (IgG). Снижение уровня свидетельствует о недостаточности гуморального иммунитета.
Циркулирующие иммунные комплексы (ЦИК). Повышение уровня ЦИК в крови характерно для:
- Острых бактериальных, грибковых, паразитарных и вирусных инфекций,
- Аутоиммунных заболеваний, коллагенозов, ревматизма, гломерулонефрита, аллергических альвеолитов, васкулитов, феномена Артюса,
- Иммунокомплексных заболеваний, сывороточной болезни; аллергических реакций 3-го типа.
Оценка результатов комплексного исследования иммунного статуса
Основным принципом оценки результатов комплексного исследования иммунного статуса у больного является количественная и функциональная оценка всех его звеньев — антигеннеспецифических и антигенспецифических факторов — и их сравнение с нормаль-ными величинами. Под нормальным состояние иммунного статуса подразумеваются показатели иммунной системы, определяемые у практически здоровых лиц различных возрастных групп. Определение параметров иммунной системы при различных патологических состояниях дает возможность разделить последние на 3 главные группы:
- без существенных изменений в иммунном статусе;
- с недостаточностью иммунной системы (иммунодефициты);
- с гиперактивацией иммунокомпетентных клеток (аутоиммунитет, аллергия).
Используя методы клинической иммунологии, необходимо выявить у больного уровень нарушений, а затем осуществлять контроль за восстановлением иммунного статуса организма в процессе лечения. Наиболее часто встречающимся нарушением состояния иммунной системы у человека являются иммунодефициты. Термином «иммунодефициты» обозначают нарушения нормального иммунологического статуса, обусловленные дефектом одного или нескольких механизмов иммунного ответа. Различают первичные и вторичные иммунодефициты. В качестве первичных выделены такие состояния, при которых нарушение иммунных механизмов (продукция иммуноглобулинов и/или Т-лимфоцитов) часто связано с генетическим блоком. В зависимости от уровня нарушений и локализации дефекта различают преимущественно следующие иммунодефициты: гуморальные, клеточные, иммунодефициты обусловленные дефектами неспецифической системы резистентности (в частности, системы фагоцитоза) и комбинированные.
Правила оценки иммунограмм.
- Комплексный анализ иммунограммы более информативен, чем оценка каждого показателя в отдельности.
- Полноценный анализ иммунограммы можно проводить лишь в комплексе с оценкой клинической картины у данного больного.
- Реальную информацию в иммунограмме несут сильные сдвиги показателей; слабые сдвиги лишь позволяют повысить уверенность в правильности сделанного заключения.
- Анализ иммунограммы в динамике всегда более информативен как в диагностическом, так и в прогностическом отношении, чем однократно полученная иммунограмма.
- В подавляющем большинстве случаев анализ иммунограммы дает возможность делать ориентировочные, а не безусловные выводы диагностического и прогностического характера.
- Первостепенную практическую значимость в иммунограмме имеют соотношения различных популяций и субпопуляций иммунокомпетентных клеток, а не их абсолютные значения.
- Несоответствие сдвигов показателей иммунограммы клинической картине течения заболевания свидетельствует о тяжелом, неблагоприятном развитии процесса.