Иммунограмма клеточный иммунитет и гуморальный иммунитет

[20-076]
Скрининговое иммунологическое обследование

8035 руб.

Это исследование включает в себя комплексную оценку субпопуляционного состава лимфоцитов, уровня основных классов иммуноглобулинов и клинический анализ крови. Такой набор тестов позволяет уточнить степень поражения иммунной системы, оценить базовые показатели клеточного и гуморального звеньев иммунитета.

* Результат не сопровождается комментариями врача – аллерголога-иммунолога.

Состав исследования:

• Определение содержания основных популяций и субпопуляций лимфоцитов
• Определение уровня основных классов иммуноглобулинов в сыворотке крови (IgA, IgG, IgM)
• Лейкоцитарная формула (с микроскопией мазка крови при выявлении патологических изменений)

Синонимы русские

Иммунограмма, иммунофенотипирование, клеточный иммунитет, гуморальный иммунитет, многоцветный клеточный анализ методом проточной цитометрии.

Синонимы английские

Human Immune System, Immunophenotyping, Multicolor Flow Cytometry Cell Analysis, Human Leukocyte Differentiation Antigens.

Метод исследования

Проточная цитометрия.

Какой биоматериал можно использовать для исследования?

Венозную кровь.

Как правильно подготовиться к исследованию?

• Исключить из рациона алкоголь в течение 24 часов до исследования.
• Детям в возрасте до 1 года не принимать пищу в течение 30-40 минут до исследования.
• Детям в возрасте от 1 до 5 лет не принимать пищу в течение 2-3 часов до исследования.
• Не принимать пищу в течение 12 часов до исследования, можно пить чистую негазированную воду.
• Полностью исключить (по согласованию с врачом) прием лекарственных препаратов в течение 24 часов перед исследованием.
• Исключить физическое и эмоциональное перенапряжение в течение 24 часов до исследования.
• Не курить в течение 30 минут до исследования.

Общая информация об исследовании

В современном понимании иммунный статус человека — это совокупность лабораторных показателей, характеризующих ко­личественную и функциональную активность клеток иммунной системы в данный момент. Оценка иммунного статуса проводится с помощью иммунологического лабораторного обследования — иммунограммы. Иммунограмма крови не отража­ет избирательно состояние патологически измененного органа или системы, но позволяет оценить иммунную систему в целом (сум­марный эффект изменения активности иммунной системы в ответ на чужеродный антиген).

Оценка клеточного состава (иммунофенотипирование) лимфоцитов крови человека — основной компонент в оценке иммунного статуса выполняется методом проточной цитофлуориметрии.

Иммунофенотипирование — характеристика клеток при помощи моноклональных антител или каких-либо других зондов, позволяющих судить об их типе и функциональном состоянии по наличию того или иного набора клеточных маркеров.

Иммунофенотипирование лейкоцитов заключается в обнаружении на их поверхности маркеров дифференциации, или CD антигенов. Лейкоциты экспрессируют ряд поверхностных и цитоплазматических антигенов, уникальных для своей субпопуляции и стадии развития. CD антигены (англ. cluster of differentiation antigens) — это антигены на поверхности клеток, маркеры, отличающие одни типы клеток от других. Дифференциации этих антигенов изучены и стандартизованы, им присвоены определенные номера. CD могут быть распознаны с помощью соответствующих моноклональных антител. Используя флюоресцентно-меченые моноклональные антитела, связывающиеся с определенными CD, можно с помощью метода проточной цитометрии произвести подсчёт содержания лимфоцитов, относящихся к различным по функции или стадии развития субпопуляциям.

В основе проточной цитофлуориметрии лежит проведение фотометрических и флюоресцентных измерений отдельных клеток, пересекающих одна за другой вместе с потоком жидкости луч монохроматического света, обычно света лазера.

Метод позволяет не только определить количественное соотношение основных популяций лимфоцитов:

• Т-лимфоциты (CD3+CD19-);
• Т-хелперы/индукторы (CD3+CD4+CD45+);
• Т-цитотоксические лимфоциты (Т-ЦТЛ) (CD3+CD8+CD45+);
• истинные «натуральные киллеры» (NK-клетки) (CD3-CD56+CD45+);
• В-лимфоциты (CD19+CD3-);

— но и оценить малые клеточные популяции, а также изучить их функциональную активность:

• Т-лимфоциты, экспрессирующие маркеры NK-клеток (Т-NK-клетки) (CD3+CD56+CD45+);
• NK-клетки, экспрессирующие α-цепь антигена CD8 (CD3-СD8+CD45+).

Когда назначается исследование?

Рекомендовано для комплексного обследования пациентов, входящих в группу риска по четырем основным иммунопатологическим синдромам.

С инфекционным синдромом:

• частые ОРВИ, хронические инфекции ЛОР-органов: гнойные синуситы, отиты, периодически встречающиеся лимфадениты, пневмонии с тенденцией к рецидивированию, бронхоплевропневмонии;
• бактериальные инфекции кожи и подкожной клетчатки (пиодермии, фурункулез, абсцессы, флегмоны, септические гранулемы, рецидивирующий парапроктит у взрослых);
• урогенитальные инфекции;
• грибковые поражения кожи и слизистых оболочек, кандидоз, паразитарные инвазии;
• рецидивирующий герпес различной локализации;
• гастроэнтеропатия с хронической диареей неясной этиологии, дисбактериозом;
• длительный субфебрилитет, лихорадка неясной этиологии;
• генерализованные инфекции: сепсис, гнойные менингиты.

С аллергическим (атопическим) синдромом:

• атопический дерматит;
• нейродермит;
• экзема с инфекционным компонентом;
• тяжелая атопическая бронхиальная астма, поллиноз, хронический астматический бронхит.

С аутоиммунным синдромом:

• ревматоидный артрит;
• рассеянный склероз;
• диффузные заболевания соединительной ткани (системная красная волчанка, склеродермия, дерматомиозит);
• аутоиммунный тиреоидит;
• неспецифический язвенный колит.

С иммунопролиферативным синдромом:

• опухолевые процессы в иммунной системе (лимфомы, болезнь Ходжкина, острый и хронический лимфолейкоз, саркома Капоши).

Что означают результаты?

Изменения различных клеточных популяций лимфоцитов в сторону повышения или понижения развиваются при различных патологических процессах в организме, таких как инфекции, аутоиммунные и онкологические заболевания, иммунодефициты, в постоперационном периоде, при трансплантации органов.

Ниже представлена таблица с клиническими ситуациями, которые могут приводить к изменениям в субпопуляционном составе лимфоцитов.

В совокупности с клиническими данными, симптоматикой, другими методами лабораторных исследований вышеуказанные изменения являются диагностическим признаком возникновения этих патологических процессов в организме человека.



Важные замечания

• Результаты данного исследования необходимо сопоставлять с клиническими данными и показателями других лабораторных анализов.
• Оценка иммунологического статуса у пациента в динамике существенно повышает клиническую значимость исследования.

Литература

1. Хаитов, Р.М. Аллергология и иммунология : национальное руководство / под ред. Р.М. Хаитова, Н.И. Ильиной. – М. : ГЭОТАР-Медиа, 2009. – 656 с.
2. Хаитов, Р.М. Руководство по клинической иммунологии. Диагностика заболеваний иммунной системы : руководство для врачей / Р.М. Хаитов, Б.В. Пинегин, А.А. Ярилин. – М. : ГЭОТАР-Медиа, 2009. – 352 с.
3. Зуева Е.Е. Иммунная система, иммунограмма : рекомендации по назначению и применению в лечебно диагностическом процессе /Е.Е Зуева, Е.Б. Русанова, А.В. Куртова, А.П. Рыжак, М.В. горчакова, О.В. Галкина – СПб. – Тверь: ООО «издательство «Триада», 2008. – 60 с.
4. Кетлинский, С.А. Иммунология для врача / С.А. Кетлинский, Н.М. Калинина. СПб. : Гиппократ, 1998. – 156 с. Ярилин, А.А. Иммунология : учебник / А.А. Ярилин. – М. : ГЭОТАР-Медиа, 2010. – 752 с.
5. Хаитов, Р.М. Иммунология : атлас / Р.М. Хаитов, А.А. Ярилин, Б.В. Пинегин.М. : ГЭОТАР-Медиа, 2011. – 624 с.
6. Хаитов, Р.М. Иммунология : учебник / Р.М. Хаитов. – М. : ГЭОТАР-Медиа, 2009. – 320 с.
7. Хаитов, Р.М. Оценка иммунного статуса человека в норме и при патологии / Р.М. Хаитов, Б.В. Пинегин // Иммунология. – 2001. – N4. – С. 4–6.
8. Whiteside, T.L. Role of Human Natural Killer Cells in Health and disease / T.L. Whiteside, R.B. Herberman // Clinical and Diagnostic Laboratory Immunology. – 1994. – Vol. 1, №2. – P. 125–133.
9. Ginadi, L. Differential expression of T-cell antigens in normal peripheral blood lymphocytes : a quantitative analysis by flow cytometry / L. Ginadi, N. Farahat, E. Matutes [et al.] // J. Clin. Pathol. – 1996. – Vol. 49, № 1. – P. 539–544.
10. Merser, J.C. Natural killer T-cells : rapid responders controlling immunity and disease / J.C. Merser, M.J. Ragin, A. August // International J. Biochemistry & Cell Biology. – 2005. – № 37. – P. 1337–1343.
11. Никитин, В.Ю. Маркеры активации на Т-хелперах и цитотокси ческих лимфоцитахна различных стадиях хронического вирусного гепатита С / В.Ю. Никитин, И.А. Сухина, В.Н. Цыган [и др.] // Вестн. Рос. Воен.-мед. акад. – 2007. – Т. 17, № 1. – С. 65–71.
12. Boettler, T. T cells with CD4+CD25+ regulatory phenotype suppress in vitro proliferation of virus-specific CD8+ T cells during chronic hepatitis C virus infection / T. Boettler, H.C. Spangenberg, C. Neumann-Haefelin [et al.] // J. Virology. − 2005. − Vol. 79, N 12. −P. 7860–7867.
13. Ormandy, L.A. Increased Populations of Regulatory T Cells in Peripheral Blood of Patients with Hepatocellular Carcinoma / L.A. Ormandy, T. Hillemann, H. Wedemeyer [et al.] // J. Cancer Res. − 2005. − Vol. 65, N 6. − P. 2457–2464.
14. Sakaguchi, S. Naturally arising FoxP3-expressing CD4+CD25+ regulatory T cells in immunological tolerance to self- and non-self / S. Sakaguchi // Nature Immunol. − 2005. − Vol. 6, N 4. − P. 345–352.
15. Romagnani, S. Regulation of the T cell response / S. Romagnani // Clin. Exp. Allergy. –2006. − Vol. 36. − P. 1357–1366.
16. Хайдуков С.В., Основные и малые популяции лимфоцитов периферической крови человека  и их нормативные значения  (метод многоцветного цитометрического анализа) /Хайдуков С.В., Зурочка А.В., Тотолян А.А., Черешнев В.А.  // Мед. иммунология. — 2009. -Т. 11 (2-3). — С. 227-238.

Полное исследование иммунитета не относится к рутинным анализам. Из-за высокой стоимости реактивов и потребности в специальном оборудовании, сделать иммунограмму можно только в крупных многопрофильных больницах или частных медицинских лабораториях. Несмотря на это, выполнение процедуры может потребоваться любому человеку, у которого были обнаружены признаки иммунодефицита без каких-либо явных причин, таких как ВИЧ, сахарного диабета, онкологического заболевания и т.д.

Чаще всего, выполнение иммунограммы требуется детям дошкольного и школьного возраста, так как именно в этот период жизни происходит «дебют» ряда наследственных заболеваний.

Что такое иммунограмма?

Это специальный анализ крови, который позволяет оценить количество различных иммунных клеток, вырабатываемых ими антител и ряда других веществ, свидетельствующих о состоянии защитных систем организма. В зависимости от цели исследования и возможностей лаборатории, количество исследуемых параметров может существенно варьироваться. Расширенное исследование позволяет изучить более 25 различных показателей – такой анализ выявляет даже скрытые нарушения, которые невозможно обнаружить стандартными методиками.

Иммунитет человека можно условно разделить на два звена – «медленное» (гуморальное) и «быстрое» (клеточное). Быстрое звено реагирует практически сразу после попадания возбудителя болезни (вируса, гриба, бактерии, простейших и т.д.) в организм. В задачу этой группы клеток входят следующие функции:

1. Поглотить и «переварить» вредоносного агента;
2. Презентировать или «рассказать» о патогенном микроорганизме другим иммунным клеткам, которые не могут самостоятельно его обнаружить;
3. Уничтожить наибольшее количество выявленных микробов;
4. Бороться с различными опухолями и аутоиммунными процессами – еще одна важная функция иммунитета, которая часто не позволяет организму самостоятельно справиться с болезнью.

После того, как «быстрое» звено поглотило чужеродное тело и рассказало о нем «медленному» звену, запускается медленный процесс создания и выброса антител в кровь. Антитела – это вещества, уничтожающие определенный вид патогенного агента. Они очень специфичны и, в большинстве случаев, помогают организму окончательно справиться с имеющимся заболеванием. В среднем, продолжительность их создания составляет 2-3 недели.

Показатели иммунограммы отражают работу каждого из звеньев защиты. Именно на основании их изменений делается вывод об отсутствии/наличии иммунодефициты, о варианте нарушения и оптимальном методе терапии.

В некоторых случаях, доктор может порекомендовать дополнить анализ исследованием содержания интерлейкинов в крови – это специальные вещества, которые обеспечивают взаимосвязь различных компонентов защитных систем. При нарушении их выработки также могут формироваться иммунодефицитные состояния.

Показания

1. Частые тяжелые инфекционные заболевания, особенно у детей дошкольного и школьного возраста. На данный момент, отсутствует единое мнение о том, что считать «частыми» и «тяжелыми» инфекциями. Однако начать подозревать проблемы с иммунитетом следует при следующих ситуациях:
   1. ОРВИ у детей легкой и средней тяжести чаще 5-6 раз в год;
   2. У взрослых (кроме пожилых лиц) – чаще 3-х раз в год;
2. Наличие в прошлом эпизодов следующих заболеваний: некротической ангины, рожи, кандидозного орофарингита, системной герпетической инфекции, атипичных пневмоний (микоплазменной, хламидийной, пневмоцистной), любые грибковые заболевания у детей (кроме грибка ногтей на ногах);
3. Обнаружение в крови низкого уровня лейкоцитов без какой-либо явной причины: перенесенной вирусной инфекции, наличие аутоиммунного или онкологического заболевания, вторичных иммунодефицитов (ВИЧ, сахарного диабета, апластической анемии, последствия приема некоторых лекарств и т.д.). Норма лейкоцитов для людей от 15-ти лет: от 4 до 9*109 клеток/литре. При исследовании крови у детей необходимо пользоваться повозрастными нормами.

Перед исследованием иммунограммы, необходимо исключить наличие вторичных иммунодефицитов, которые были перечислены выше. Обнаружить их достаточно просто, с помощью обычных анализов крови, при этом стоимость их будет значительно ниже, чем обследование функции лейкоцитов и других фагоцитов.

Подготовка к процедуре

Для получения объективных результатов необходимо правильно действовать перед забором крови. Для этого достаточно руководствоваться следующими простыми правилами:

1. Проходить обследование лучше в утренние часы, натощак. При отсутствии такой возможности, допустимо сдать кровь в любое другое время после 4-х часового периода голода;
2. В течение 3-х часов перед анализом не рекомендуется употреблять алкоголь, кофеин-содержащие напитки, энергетики. Воду и некрепкий чай можно пить без ограничений;
3. За несколько часов до процедуры не следует курить или находиться в присутствии курящего человека;
4. Непосредственно перед сдачей крови следует исключить значительные физические нагрузки (бег, подъем тяжестей, занятия спортом), контрастные водные процедуры, переохлаждение/перегревание организма;
5. Для получения наибольшей информативности, иммунограмму ребенку и взрослому лучше проводить в период полного здоровья. Во время болезни организм будет реагировать на повреждение собственных тканей или на инфекцию, поэтому делать вывод о картине крови достаточно сложно.

Норма

Расшифровка иммунограммы намного сложнее, чем анализ обычного анализа крови. Данное исследование включает в себя большое количество показателей, которые не только нужно сверять с существующими нормами, но и анализировать их в комплексе. Однако, в первую очередь, необходимо знать нормальные значения.

В разных лабораториях они могут несколько отличаться. Это связано с использованием различных средств, методов диагностики и реактивов. Как правило, нормы иммунограммы приведены на листе с результатами обследования. Если они отсутствуют, мы предлагаем воспользоваться следующей таблицей иммунограммы:

Принципы расшифровки результатов

Анализ иммунограммы должен проводить специалист с квалификацией «врач-иммунолог». В этом случае, вероятность получения правильного заключения крайне высока. Доктор проводит комплексную оценку всех параметров, с целью определения наличия/отсутствия проблем в клеточном или гуморальном звене иммунитета. От этого будет зависеть дальнейшая тактика лечения, метод поддержания иммунитета и профилактика частых инфекций.

• В большинстве случаев, снижение показателей, отражающих состояние клеточного или «быстрого» звена является признаком проблемы с активацией или выработкой Т-клеток.
• Исключение составляет количество Т-супрессоров – о снижении защитных функций человека будет свидетельствовать повышение этого пула клеток. Такие результаты, полученные при расшифровке иммунограммы у детей, нередко является признаком первичного Т-клеточного иммунодефицита. Это группа врожденных заболеваний, при которых организм не может своевременно и достаточно хорошо «отражать атаки» враждебных микроорганизмов.
• О проблемах в гуморальном звене будет свидетельствовать сниженное количество В-клеток и иммуноглобулинов (кроме IgE, который отвечает за развитие аллергии). Следует помнить, что значимым является только одновременное снижение и концентрации В-лимфоцитов и вырабатываемых ими антител (иммуноглобулинов).

Другие показатели позволяют уточнить характер нарушений и подтвердить предполагаемый диагноз. Необходимо еще раз подчеркнуть, что правильно интерпретировать этот сложный анализ может только врач-иммунолог.

Определение степени иммунных нарушений

Существует большое количество подходов, для оценки состояния пациента. Часть из них предлагают подсчет количества заболеваний с учетом их тяжести за год, другие являются чисто расчетными методами. По иммунограмме также можно определить выраженность нарушений работы гуморального и клеточного звена или оценивать эффективность лечения на протяжении определенного количества времени.

Для этого необходимо воспользоваться следующей формулой:

((Патологический показатель больного / Норма данного показателя ) – 1 ) * 100%

В качестве исследуемого параметра, чаще всего используют количество В-клеток, Цитотоксических клеток или Т-хелперов. Если полученный результат имеет отрицательное значение, можно определить выраженность нарушений и потребность в активной медикаментозной терапии:

Причины ложных результатов

Помимо врожденных особенностей иммунитета существует большое количество патологий, которые приводят к изменению показателей анализа. Чтобы не запутаться, необходимо понимать, что показывает иммунограмма на самом деле. Она отражает количество и состояние различных групп лейкоцитов и фагоцитов – клеток крови и внутренних органов, ответственных за защиту организма.

Традиционно, иммунограмма используется для выявления наследственных нарушений иммунитета. Поэтому перед ее проведением следует исключить наличие наиболее распространенных состояний, способных также оказывать негативное влияние на естественную защиту человека. К ним относятся:

• Злокачественные опухоли любого органа;
• Аутоиммунные заболевания: ревматоидный артрит, системные склеродермия и волчанка, различные системные васкулиты (в том числе болезнь Бехчета, микроскопический и гигантоклеточные васкулиты, узелковый периартериит и т.д.);
• Вирусные заболевания, в том числе ВИЧ, «кровяные» гепатиты;
• Выраженные интоксикации: алкоголем, наркотическими веществами, промышленными вредными веществами, ядами и т.д.;
• Апластические анемии – группа болезней, при которых нарушается рост и созревание всех клеток крови;
• Последствия радиационного облучения.

Также необходимо помнить, что причиной ложного повышения или снижения параметров может быть неправильная подготовка к сдаче крови. Только после исключения всех вышеперечисленных состояний можно говорить о наличии первичного иммунодефицита. В качестве подтверждающего теста можно использовать медико-генетическое исследование.

«Мифы» об иммунитете

Свежие фрукты и овощи поправят пошатнувшийся иммунитет

Несомненно, эти продукты полезны при многих заболеваниях. В частности, они являются источником растительной клетчатки, которая стимулирует нормальное пищеварение. При атрофии слизистой желудка, они улучшают выделение пищеварительных соков и помогают в переработке пищи. Однако количество получаемых витаминов из фруктов и овощей крайне незначительно и не может помочь в лечении иммунных расстройств;

Выявленный иммунодефицит у ребенка можно не лечить – после полового созревания он пройдет самостоятельно

Такое мнение очень распространено не только среди населения, но и среди определенной группы докторов. Подобное суждение очень опасно – вопрос о необходимости лечения в каждом индивидуальном случае решает врач-иммунолог. И если риск возникновения частых и тяжелых инфекций превышает риск возникновения побочного действия от лекарств (которые достаточно редки), проведение терапии необходимо для ребенка;

Иммуномодуляторы абсолютно бесполезны в лечении иммунодефицитов

Несколько лет назад было проведено большое исследование, которое подтвердило, что использование иммуномодуляторов уменьшает продолжительность лечения ОРВИ только на 1 сутки и менее. То есть имеют совершенно незначительный эффект. Этот аргумент часто используют некоторые доктора и пациенты, обосновывая свой отказ от их применения при первичных иммунодефицитах. Вас ничего не смущает в этом аргументе?

• Во-первых, целью исследования было оценить влияние на продолжительность лечения, но не на профилактику возникновения инфекционных заболеваний.
• Во-вторых – оно проводилось на здоровых людях, которые не страдали иммунодефицитами. Если изучить зарубежную литературу и результаты подходящих исследовательских работ, то можно обнаружить следующую информацию. Иммуномодуляторы обладают относительно небольшой эффективностью, но они профилактируют развитие тяжелых и частых инфекций у людей с первичными иммунодефицитами, а также снижают вероятность смертельного исхода.

На данный момент, за рубежом существуют другие – более эффективные лекарственные средства для поддержания защитных систем организма. Одна их цена многократно выше, а доступность в России крайне ограничена. Поэтому иммуномодуляторы, лизаты микроорганизмов, препараты интерферона являются одним из вариантов лечения данных заболеваний в РФ.

ВИЧ нужно диагностировать по иммунограмме

Несомненно, при длительном действии вируса иммунодефицита снижается количество CD4+ клеток. Именно по этому показателю, часто оценивают тяжесть заболевания и вероятность развития смертельно опасных инфекций, ассоциированных со СПИД и ВИЧ. Однако для диагностики этой инфекции необходимо использовать более специфические методы, такие иммуноферментный анализ (ИФА) и иммуноблотинг.