Оценки в системы иммунитета
(ГУМОРАЛЬНЫЙ ИММУНИТЕТ).
Гуморальный иммунный ответ обеспечивается антителами, или иммуноглобинами. У человека различают 5 основных классов иммуноглобинов: IgA, IgG, IgM, IgE, IgD. Все они имеют как общие, так и специфические детерминанты.
Иммуноглобины класса G.У человека являются наиболее важными. Концентрация их достигает 9-18 г/л. Иммуноглобины этого класса обеспечивают противоинфекционную защиту, связывают токсины, усиливают фагоцитарную активность, активируют систему комплемента, вызывают аглютинацию бактерий и вирусов, они способны переходить через плаценту, обеспечивая новорожденному так называемый пассивный иммунитет.
Иммуноглобины класса А. Делят на 2 разновидности: сывороточные и секреторные. Первые из них находятся в крови, вторые – в различных секретах. Соответственно этому сывороточный иммуноглобин А принимает участие в общем, иммунитете, а секреторный обеспечивает местный иммунитете, создавая барьер на пути проникновения инфекций и токсинов в организм.
Секреторный находится в наружных секретах – в слюне, слизи трахеобронхиального дерева, мочеполовых путей, молоке. Молекулы иммуноглобина А, присутствующие во внутренних секретах и жидкостях, существенно отличаются от молекул наружных секретов. Секреторный компонент, по всей видимости, образуется в эпителиальных клетках и в дальнейшем присоединяется к молекуле IgA.
IgA нейтрализует токсины и вызывает аглютинацию микроорганизмов и вирусов. Концентрация сывороточных IgA колеблется от 1,5 до 4 г/л.
Содержание IgA резко возрастает при заболеваниях верхних дыхательных путей, пневмониях, инфекционных заболеваниях желудочно-кишечного тракта и др.
Иммуноглобины класса Е.Принимают участие в нейтрализации токсинов, опсонизации, аглютинации и бактериолизисе, осуществляемом комплементом. К этому классу также относятся некоторые природные антитела, например к чужеродным эритроцитам. Содержание IgE повышается при инфекционных заболеваниях у взрослых и детей.
Иммуноглобины класса D.Представляют собой антитела, локализующиеся в мембране плазматических клеток, в сыворотке их концентрация невелика. Значение IgD пока не выяснено, предполагают, что они участвуют в аутоиммунных процессах.
Для оценки В-системы иммунитета применяется несколько методов.
1. Определение В-лимфоцитов в крови.
2. Определение в крови уровня иммуноглобулинов. Проводят определение суммарной концентрации иммуноглобулинов и количество иммуноглобулинов разных классов.
3. Определение наличия и уровня изогемагглютининов в сыворотке крови, а также естественных (нормальных) антител к широко распространенным бактериям и вирусам. В качестве антигенов можно использовать кишечную палочку, стафилококковые токсины, вирус герпеса и др. Следует отметить и иметь в виду, что альфа- и бета-изогемагглютинины относятся к Jg M.
4. Стимуляция биосинтеза иммуноглобулинов В-лимфоцитами in vitro.
5. Исследование антителогенеза (первичного и вторичного ответа) после активной иммунизации несколькими убитыми вакцинам .Применяют коклюшную и убитую полиомиелитную вакцины, дифтерийный и столбнячный анатоксин, полисахаридные антигены, выделенные из пневмококков, менингококков и бактерий кишечной группы.
6. Исследование катаболизма иммуноглобулинов в организме. В кровь вводят меченый препарат человеческого иммуноглобулина.
7. Биопсия лимфатических узлов, костного мозга, участков слизистой оболочки кишечника. Эту процедуру проводят с целью гистологического обнаружения плазматических клеток, наличие и структуры лимфоидных фолликулов.
8. Кожные реакции, выявляющие гиперчувствительность немедленного типа. К таким пробам относятся ШИК-реакция и другие.
Иммунный статус (ИС) – совокупность количественных и функциональных показателей, отражающих состояние иммунной системы человека в данный момент времени. Это понятие введено для объективной оценки состояния иммунной системы человека. Изучение показателей иммунитета при иммунных нарушениях должно включать исследования количества и функциональной активности основных компонентов иммунной системы. Все нарушения функции иммунной системы классифицируют, исходя из проявлений различных заболеваний. Выделяют первичные и вторичные иммунодефициты, аутоиммунные, аллергические и лимфопролиферативные заболевания.
Для оценки функционирования всех компонентов иммунной системы, Т и В системы иммунитета, фагоцитарной и системы комплемента, должны быть включены количественные и функциональные методы. Для оценки гуморального звена иммунитета выполняют следующие исследования: определение продукции иммуноглобулинов разных классов в сыворотке крови; определение относительного и абсолютного содержания В-лимфоцитов и их субпопуляций, компонентов комплемента и циркулирующих иммунных комплексов, функциональные тесты (реакция бласттрансформации с митогенами), определение специфических антител, кожные пробы.
Для оценки Т-клеточного звена проводят исследования с определением относительного и абсолютного количества Т-лимфоцитов и их субпопуляций (Т-хелперов, ЦТЛ), натуральных киллеров, их активационных маркеров, функциональные тесты (реакция бласт-трансформации с митогенами), определение продукции цитокинов.
Состояния фагоцитарной системы оценивают по многим тестам: адгезивная способность нейтрофилов по прилипанию к волокнам нейлона; миграция, хемотаксис в реакции торможения миграции нейтрофилов; метаболическая активность и образование активных форм кислорода по восстановлению нитросинего тетразолия; фагоцитарная активность нейтрофилов в тестах спонтанного и стимулированного микробными полисахаридами фагоцитоза; иммунофенотипирование нейтрофилов.
Ранее эти методы были разделены на тесты 1-го и 2-го уровня. Тесты 1-го уровня являются ориентировочными и направлены на выявление грубых дефектов в иммунной системе. Тесты 2-го уровня направлены на идентификацию конкретной “поломки” в иммунной системе.
Тесты 1-го уровня
- определение относительного и абсолютного количества лейкоцитов, нейтрофилов, моноцитов, лимфоцитов и тромбоцитов периферической крови;
- определение функциональной активности нейтрофилов (НСТ тест);
- тесты иммунофенотипирования для определения относительного и абсолютного количества Т- и В-лимфоцитов, натуральных киллеров;
- определение концентрации иммуноглобулинов основных классов (IgA, IgM, IgG, IgE);
- определение гемолитической активности комплемента.
С помощью минимального набора тестов можно диагностировать первичные иммунодефициты: хроническую грануломатозную болезнь, Х-сцепленную агамма-глобулинемию, гипер–IgM–синдром, селективный дефицит IgA, синдром Вискотта-Олдрича, тяжелый комбинированный иммунодефицит.
Тесты 2-го уровня
- тесты иммунофенотипирования для определения относительного и абсолютного количества популяций и субпопуляций Т-, В-, NK-лимфоцитов;
- активационные маркеры лимфоцитов;
- оценка различных этапов фагоцитоза и рецепторного аппарата фагоцитарных клеток;
- определение основных классов и подклассов иммуноглобулинов;
- циркулирующие иммунные комплексы;
- определение концентрации компонентов комплемента в сыворотке крови (С3, С4, С5, С1-ингибитор);
- функциональная активность различных субпопуляций лимфоцитов;
- оценка пролиферативной активности Т- и В-лимфоцитов;
- исследование интерферонового статуса;
- кожные пробы и т.д.
Набор полученных показателей при иммунологическом обследовании называется иммунограммой.
Следует особо подчеркнуть, что полноценный анализ иммунограммы возможен только в комплексе с клиническим состоянием и анамнезом пациента. Отсутствие характерных сдвигов в иммунограмме при выраженных клинических симптомах следует считать атипичной реакцией иммунной системы, что является отягощающим признаком заболевания. Полученные данные пациента сравниваются со средними значениями для данного аналита, полученными в регионе проживания пациента. Среднестатистические показатели различаются в зависимости от региона и подчиняются климатогеографическим условиям, экологической обстановке, условиям жизни. Необходимо также учитывать возраст пациента и циркадные ритмы.
Исследование показателей ИС имеет большое значение для диагностики и дифференциальной диагностики, особенно при первичных иммунодефицитах и лимфопролиферативных заболеваниях, для оценки тяжести, активности, длительности течения и прогноза различный заболеваний, оценки эффективности проводимого лечения.
. Иммунный статус. Влияние климато-географических,
социальных, экологических и медицинских факторов. Оценка иммунного статуса,
определение состояния гуморального и клеточного иммунитета. Основные показатели
и методы их определения.
Состояние функциональной активности иммунной системы
человека в целом имеет жизненно важное значение для организма и обозначается
понятием «иммунный статус».
Иммунный
статус это количественная и
качественная характеристика состояния функциональной активности органов
иммунной системы и некоторых неспецифических механизмов про-тивомикробной
защиты.
Влияние
факторов
Среди
климато-географических факторов на иммунный статус оказывают влияние
температура,влажность, солнечная радиация, длина светового дня и т.д.Например:
фагоцитарная активность и кожные аллергические пробы менее выражены у жителей
северных районов, чем у южан.Вирус Эпштейна Барр у людей белой расы вызывает
инфекционное заболевание-мононуклеоз а у лиц негроидной расы онкопатологию и
т.д.Жители Африки менее подвержены заб дифтерии чем европейское население.
К
социальным факторам относятся питание, жилищно-бытовые условия,
профессиональные вредности и т.д. Важное значение имеет сбалансированное и
рациональное питание.
Экологические
факторы:загрязнение окружающей среды радиоактивными веществами, широкое
применение пестицидов в сельском хозяйстве, выбросами химических предприятий и
автотранспорта.
Медицинские
факторы: диагностические и лечебные медицинские манипуляции лекарственные
средства стресс.например рентгенография, травмы,операции,антибиотики. Стресс
приводит к нарушениям в работе Т-системы иммунитета действуя в первую очередь
через ЦНС.
Оценка
иммунного статуса
Можно
определить путем постановки комплекса лабороторных тестов включающих оценку
состояния факторов неспецифической резистентности гуморального(В-система) и
клеточного(Т-система)иммунитета.Оценка иммунного статуса проводится в клинике
при трансплантации органов и тканей аутоиммунных заболеваний аллергиях для
выявления иммунологической недостаточности при различных заболеваниях для
контроля эффективности лечения болезней связанных с нарушениями иммунной
системы.В зависимости от возможностей лаборотории оценка иммунного статуса чаще
всего базируется на определении комплекса следующих показателей:1.общего
клинического обследования2.состояния факторов естественной
резистентности3.гуморального иммунитета4.клеточного иммунитета5.дополнительных
тестов.При общем клиническом обследовании учитывают жалобы пациента
анамнез клинические симптомы результаты общего анализа крови,данные
биохимического исследования(спрашивают у пациента наличие профессиональных
вредностей,аллергии,инфекции, перенесенные в детстве заболевания,о
травмах,операциях,о лекарственных препаратах которые принимает,при осмотре
обращают внимание на чистоту кожных покровов и слизистых,при пальпации и
перкуссии уделяют внимание тимусу лимфатич узлам селезенке,обследуют анализ
крови о состоянии иммунокомпетентных клеток(лимфоциты,фагоциты). При
оценке состояния факторов резистентности определяют фагоцитоз компемент
интерфероновый статус колонизационную резистентность. Функциональную активность
фагоцитов определяют по их подвижности, адгезии,поглощению,расщеплению
захваченный частиц, образованию активных форм кислорода. С этой целью
используют такие тесты как определение фагоцитарного индекса,НСТ-тест и
др.Состояние системы комплемента определяют в реакции гемолиза. Интерфероновый
статус выявляют путем трирования на культуре клеток уровня интерферона в
сыворотке крови. Колонизационную резистентность определяют по степени дисбиоза
различных биотопов организма(чаще толстой кишки)
Гуморальный иммунитетопределяют по уровню иммуноглобулинов классов G,M,A.D,E в сыворотке крови количеству специфических антител,
катаболизму иммуноглобулинов, ГНТ, показателю В-лимфоцитов в переферической
крови и т.д. Для определения концентрации иммуноглобулинов в сыворотке крови
обычно используют иммунодиффузию по Манчини.Титр специфических антител
определяют в различных иммунологических реакциях(агглютинация, РПГА, ИФА и др.)
Число В-лимфоцитов устанавливают путем определения специфических рецепторов на
клетках с помощ моноклональных антител. фУнкциональное состояние В-лимфоцитов
определяют в реакции бласттрансформации путем стимуляции клеток митогенами,
например туберкулин и др. При оптимальных условиях культивирования В-лимф с
митогенами показатель трансформации в бласты может достигать 80%.Подсчет
бластов производят под микроскопом . Состояние клеточного иммунитетаоценивают по количеству Т-лимфоцитов а
также субпопуляций Т-лимфоцитов в периферической крови, бласттрансформации
Т-лимф под действием Т-клеточных митогенов, определению гормонов тимуса, уровню
цитокинов, а также кожные пробы с аллергенами. Для постановки кожных
аллергических проб с используются антигены, к которым в норме должна быть
сенсибилизация, например проба Манту с туберкулином. Для определения числа
Т-лимфоцитов в периферической крови используют реакцию розеткообразования Е-РОК
поскольку эритроциты барана образуют с Т-лимфоцитами спонтанные розетки.
Бласттрансформацию Т-лимфоцитов определяют путем стимуляции Т-клеточными
митогенами. Для оценки состояния функции тимуса чаще всего применяют
определение уровня α1-тимозина и тимулина. В качестве дополнительных тестов для
оценки иммунного статуса можно использовать такие тесты как определение
бактерицидности сыворотки крови, титрование С3, С4 компонентов комплемента,
определение содержания С-реактивного белка в сыворотке крови. Все тесты
разделены на две группы: Тесты 1-го уровня могут быть выполнены в любой
клинической иммунологической лаборотории первичного звена здравоохранения, они
используются для первичного выявления лиц с явно выраженной иммунопатологией.
Они вкяючают в себя определение:
‘
общего и относительного числа лимфоцитов;
—основных субпопуляций (Т- и В-клетки);
—фагоцитарной активности лейкоцитов;
—концентрации иммуноглобулинов разных классов в
сыворотке крови.
Общее
(абсолютное) и относительное число лимфоцитов определяют по данным клинического
анализа крови. Содержание Т- и B-лимфоцитов подсчитывают в реакции
иммунофлюорес-ценции, используя меченые моноклональные флюоресцирующие
сыворотки к специфическим поверхностиым антигенным маркерам,
обозначаемым
символами CD(clasterdifferentiation). Таких
антигенных маркеров известно несколько десятков, но отдельные из них
характерны для того или иного типа клеток:
•
рецептор CD3 — всех ‘Г-лимфоцитов;
•
рецепторы CD 19, 20. 21, 72 — В-лимфоцитов;
•
рецепторы CD4 — Т-хелперы;
•
рецепторы CD8 — Т-супрессоры;
•
рецепторы CD 16 — NK-клетки
(натуральные киллеры).
Для более точной диагностики используются
тесты 2-го уровня позволяют провести более глубокий анализ состояния иммунной
системы и уточнить характер дефектов, выявленных с помощью тестов 1-го уровня.
К ним относятся, например, определение отдельных субклассов иммуноглобулинов
(особенно IgG, секреторного IgA) и B-лимфоцитов, регу-ляторных и эффекторных клеток.
Кроме того,
с помощью иммуноферментных и радиоиммунных методов можно определить
концентрации отдельных цитоки-нов главных регуляторных молекул,
определяющих тип иммунного ответа.
Исследование уровня лейкоцитов в крови можно пройти практически в любом медицинском учреждении.
Подробнее об услуге…
При подозрении на аллергию, как правило, рекомендуется комплекс исследований для выявления аллергена.
Подробнее об услуге…
Стоимость комплекса исследований для выявления аллергена может колебаться в зависимости от срочности исследования, уровня клиники и некоторых других факторов.
Подробнее…
Выбирая лабораторию, стоит ознакомиться с уровнем цен и сервиса.
Услуги и цены…
Некоторые частные лаборатории оказывают услуги по взятию крови из периферической вены на дому.
Подробнее…
Принято считать, что функция иммунной системы — защита организма от возбудителей заболеваний, чужеродных и потенциально опасных микроорганизмов, проникших в тело человека извне. Однако она также защищает нас изнутри, препятствуя росту опухолей и помогая удалять погибшие клетки. Таким образом, иммунная система постоянно находится в активном режиме. Сбои в ее работе не всегда заметны, но опытный врач обратит внимание на трудноразличимые симптомы и назначит иммунологическое исследование крови, о котором и пойдет речь в нашем обзоре.
Как мы уже говорили, иммунная система защищает человека от опасных микроорганизмов и поддерживает рабочее состояние организма благодаря слаженной работе множества клеток различных типов. К сожалению, в иммунной системе случаются сбои. Они бывают кратковременными, обратимыми, связанными с ослаблением организма, или более серьезными, представляющими угрозу здоровью и требующими лечения.
Так, при некоторых заболеваниях иммунная система проявляет нежелательную активность. Например, у аллергиков развивается иммунная реакция на молекулярные соединения, входящие в состав безобидных предметов и организмов — на зерна пыльцы или эфирные масла растений, пищевые белки, споры грибов. У пациентов с аутоиммунными заболеваниями иммунная система обращается против собственных тканей, начиная их «атаковать» как чужеродные и опасные. При иммунодефицитных состояниях то или иное звено иммунитета перестает функционировать. А опухолевые патологии крови, такие как лейкозы, гемобластозы, лимфомы, а также поражения костного мозга, приводят к накоплению нефункциональных клеток иммунной системы, которые способны уничтожить собственный организм.
На основании результатов оценки изменений в клеточном составе и в составе синтезируемых иммунной системой молекул можно выявить заболевание и оперативно начать его лечение.
Что такое иммунологическое исследование и когда оно назначается?
Иммунологическое исследование — комплекс лабораторных анализов, которые позволяют понять, какие нарушения возникли в работе иммунной системы пациента. Оно позволяет оценить сотни показателей. Объектом для изучения обычно является венозная кровь.
Оценка состояния иммунной системы может потребоваться при диагностике и лечении широкого круга заболеваний. А значит — иммунологическое исследование крови могут назначить врачи общей практики, ревматологи, аллергологи, иммунологи, онкологи, гастроэнтерологи.
Причинами назначения анализа могут стать:
- плохое самочувствие;
- утомляемость;
- частые простудные заболевания;
- частые обострения хронических заболеваний и др.
Обычно при неясной клинической картине и неспецифических симптомах (к ним относятся и перечисленные выше) назначается комплексное исследование иммунитета, включающее оценку:
- содержания в крови клеток иммунной системы с различными функциями;
- активности иммунных клеток;
- способности клеток поглощать бактерии и синтезировать антитела.
При подозрении на аллергические заболевания назначается комплекс иммунологических исследований на чувствительность к аллергенам. Набор оцениваемых показателей определится на основании подробного опроса пациента. Если больной замечает, что неприятные симптомы появляются, когда он гуляет за городом в июне, целесообразно провести исследование на чувствительность к пыльце растений. При отсутствии подозрений на причину аллергических реакций, скорее всего, будет назначено исследование на наличие антител к наборам аллергенов (аллергопанели):
- пищевым аллергенам;
- аллергенам, которые вдыхаются с воздухом (пыльца);
- аллергенам, которые окружают человека в его доме (пыль, перо, шерсть животных) и т.д.
Заподозрив у пациента аутоиммунное заболевание, например волчанку, врач немедленно направляет его на иммунологическое исследование на антитела к ядрам собственных клеток в крови.
Как сдавать биоматериал на исследование иммунологического статуса?
Как и к любому анализу крови, к иммунологическому исследованию нужна соответствующая подготовка. Некоторые показатели, например, наличие ответа на аллергены, можно оценивать в течение всего дня. Это значит, что прийти в лабораторию и сдать анализы допустимо сразу после визита к врачу. Однако к сдаче крови на описание клеток иммунной системы, оценку ее активности и ряд других показателей нужно подготовиться заранее. За день до сдачи крови избегайте физических нагрузок. Кровь сдается натощак, так что лабораторию придется посетить утром. Чтобы избежать ошибок при подготовке к иммунологическому исследованию, в каждом конкретном случае лучше заранее проконсультироваться у врача, назначившего анализ.
Для иммунологического исследования отбирается кровь из вены. При комплексных исследованиях может понадобиться несколько пробирок.
Срок ожидания бланка с результатами колеблется. Если речь идет об оценке содержания клеток иммунной системы или присутствии антител, результат как правило будет готов через 2–3 дня. Бланк по итогам комплексного исследования на большое количество аллергенов обычно выдается на 10–11 день. При исследовании активности клеток иммунной системы срок ожидания также будет довольно продолжительным — примерно 9 дней.
Какие показатели исследуются и о чем говорит отклонение от нормы
Самым очевидным показателем состояния иммунной системы является общий уровень лимфоцитов в крови. Его повышение относительно нормы практически говорит о воспалении. Для конкретизации анализа потребуется оценить концентрацию отдельных категорий клеток иммунной системы.
Так, при снижении количества Т-лимфоцитов, вызывающих гибель зараженных вирусом клеток (норма 210–1200 клеток на мл крови), и повышении числа B-лимфоцитов (норма 100–480 клеток на мл), продуцирующих антитела, врач заподозрит аутоиммунное или аллергическое заболевание.
Снижение содержания в крови клеток-регуляторов иммунного ответа — T-хелперов (в норме концентрация 540–1460 на мл) — верный признак иммунодефицита.
Важное диагностическое значение имеет показатель активности иммунных клеток. Если более 20% клеток, отвечающих за уничтожение патогена и регуляцию иммунного ответа, находятся в активированном состоянии, необходимо срочно принимать меры борьбы с восполнением.
В ходе иммунологического исследования также может быть оценена способность клеток к поглощению бактерий. Если 25% клеток теряют ее, речь идет о развитии у взрослого пациента иммунодефицита на фоне тяжелых инфекций, а у ребенка позволяет заподозрить врожденные дефекты.
На заметку
Так как количество исследуемых показателей исчисляется сотнями, логично, что и методов их определения не мало. Например, клетки иммунной системы изучают с помощью проточной цитометрии, а число молекул, обеспечивающих иммунную защиту, оценивают с помощью цветных реакций методом ИФА.
На основании анализа отдельных показателей достоверный диагноз поставить практически невозможно. Врач принимает во внимание множество факторов. Кроме того, некоторые отклонения от нормы нельзя рассматривать как признак патологии иммунной системы. Например, после тяжелой операции или перенесенной недавно инфекции отклонения от нормальных показателей иммунной системы свидетельствуют об активной работе организма по восстановлению. Все это говорит о том, что самодиагностика на основании результатов в бланках анализа опасна.
Цена на иммунологические исследования
Стоимость иммунологического исследования оценивается, исходя из объема работ и применяемого метода. Следует учитывать и цену за взятие крови — в среднем это 200 рублей.
Комплексное исследование крови, позволяющее оценить состояние иммунной системы, обойдется в сумму примерно в 12 000 рублей. При мониторинге лечения обычно назначается скрининговая программа, стоимость которой приблизительно 7500 рублей, или оцениваются отдельные показатели, например лимфоциты, вырабатывающие антитела, что обойдется в сумму около 1300 рублей.
Скрининговое исследование на волчанку стоит порядка 700 рублей, комплексное — около 4000 рублей.
Исследование на чувствительность к аллергенам стоит около 500–600 рублей за каждый показатель. Сократить расходы можно, выбрав одну из комплексных программ — например панель из двадцати аллергенов. В «ИНВИТРО», например, такого рода исследование обойдется в суму около 4000 рублей.
Современная лабораторная диагностика сделала доступным выявление заболеваний еще до развития тяжелых симптомов, хотя сравнительно недавно об этом нельзя было и мечтать. Терапия, назначенная по результатам иммунологических тестов, позволяет если не победить болезнь, то, по крайней мере, предотвратить рецидивы заболевания.